瑞士洛桑聯(lián)邦理工學院(EPFL)開發(fā)了生成細胞三維(3D)圖像的技術(shù)。
Nanolive公司利用先進的軟件,根據(jù)細胞的折射率信息生成細胞圖像
Nanolive是從瑞士洛桑聯(lián)邦理工學院(EPFL)衍生出來的初創(chuàng)公司,公司推出的CX-A顯微鏡系統(tǒng)是該公司第一款可實現(xiàn)非侵入式3D成像和自動化分析的顯微鏡。
該系統(tǒng)不僅可以用于細胞健康、增殖、運動和功能等宏觀細胞動力學研究,還能夠探索線粒體網(wǎng)絡(luò)等微觀細胞器動力學和相互作用。
Nanolive公司Mathieu Frechin表示:“通過我們的顯微鏡,科學家可以在一系列條件下進行實驗,并利用細胞的折射率生成高質(zhì)量圖像,而無需添加熒光標記。”
該系統(tǒng)利用細胞的折射率生成細胞全景圖像,它采用旋轉(zhuǎn)的激光束45°照射樣品,生成的全息信息隨后可以通過定制軟件編譯成3D圖像。
據(jù)Nanolive介紹,該方法為非侵入式且無干擾性,旋轉(zhuǎn)掃描可實現(xiàn)高分辨率3D重構(gòu)。
結(jié)合熒光成像的其他數(shù)據(jù),該系統(tǒng)還可以讓科學家隨著時間的推移,跟蹤細胞動態(tài)和微細變化,例如線粒體等亞細胞結(jié)構(gòu)的膜電位。這些信號揭示了在藥物或基因突變的反應(yīng)中細胞結(jié)構(gòu)和活性的細微變化。
自動分析
在2013年Nature Photonics發(fā)表的一篇關(guān)于該技術(shù)基礎(chǔ)研究的論文中,作者稱之為斷層掃描衍射顯微鏡,該技術(shù)結(jié)合了微全息技術(shù)與斷層掃描技術(shù)。在傅里葉域中改變照射角度并測量入射波在樣品中的衍射,能夠提高系統(tǒng)整體的分辨率,經(jīng)試驗表明,當采用405納米光源照射時,橫向分辨率可能達到90納米。
同年,Nanolive獲得270萬瑞士法郎的啟動資金,從EPFL分拆出來獨立運營,Nanolive表示CX-A采用520納米光源,其分辨率可以達到200納米以下,對單個細胞器進行成像。
Nanolive公司評論稱:“整合全息技術(shù)及旋轉(zhuǎn)掃描技術(shù)為一體,使得Nanolive 3D顯微鏡成為一種革新性的技術(shù)。全息技術(shù)提供了一種獨特的在細胞自然生長環(huán)境下測量細胞的方法:無標記、無侵入性、免處理、無干擾性。旋轉(zhuǎn)掃描可以實現(xiàn)3D重構(gòu),去除噪音和獲得遠超光學可接受極限的分辨率?!?/p>
該系統(tǒng)的關(guān)鍵是實現(xiàn)了自動化分析,具有在同一平臺內(nèi)編程多個成像方案的能力,允許用戶并行運行不同的應(yīng)用程序。根據(jù)Nanolive稱,該系統(tǒng)每小時可以收集數(shù)百張圖像,并且可以持續(xù)分析數(shù)天或數(shù)周,同時保證細胞在生理可控環(huán)境中不受干擾。
Nanolive首席技術(shù)官Sebastien Equis表示:“每一項新發(fā)現(xiàn)都始于前所未有的觀察,我們創(chuàng)造了一種獨特的工具,可以從宏觀層面的細胞種群,一直深入探尋到微觀層面單個細胞器的生態(tài)系統(tǒng)。”
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原文標題:利用折射率信息的3D顯微鏡系統(tǒng)可實現(xiàn)長時間活細胞成像
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