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Prominence nano 納升液相色譜儀
Prominence nano系列是一套納升LC系統(tǒng)，可在納升流量下進(jìn)行精準(zhǔn)流速的溶劑輸送。按照應(yīng)用不同，可以配置成1D和2D系統(tǒng)。
Prominence nano具備納升流速下的高保留時(shí)間重復(fù)性，非常低的系統(tǒng)死體積和極低的交叉污染等特點(diǎn)。

Nano-Assist一維LC設(shè)置圖

應(yīng)用

高保留時(shí)間重復(fù)性

蛋白質(zhì)組分析需要比較不同樣本的色譜峰差異，而樣本中又存在許多特征相似的多肽，對(duì)保留時(shí)間的重復(fù)性要求非常高。Prominence nano系統(tǒng)的高重復(fù)性可保證蛋白質(zhì)組分析的高精數(shù)據(jù)，配置了RFC系統(tǒng)的LC-20AD nano可以在流速為300 nL/min獲得RSD不超過(guò)0.2% 的保留時(shí)間重復(fù)性。

牛血清白蛋白（BSA）酶解樣品的重復(fù)性

2維 LC的高分辨率

牛血清白蛋白（BSA）酶解樣品的重復(fù)性

在蛋白質(zhì)組學(xué)分析時(shí)，單一的1D反相分離不足以提供足夠的色譜峰容量；所以，為了實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品的分離，需要進(jìn)行2D分離以保證足夠的峰容量。Prominence nano系統(tǒng)可以進(jìn)行2D分析，結(jié)合陽(yáng)離子交換和反相模式，為蛋白質(zhì)組學(xué)分析提供所需的核心技術(shù)。下圖為200fmol酵母蛋白質(zhì)的分析圖，1D分離中的未分離組分在2D中繼續(xù)分離成幾個(gè)組分，2D分離的峰容量大大大于1D所獲得的效果。

分析條件

1維

柱	PolysulfoethylA (50mmL.×1mmI.D.)
流動(dòng)相	甲酸銨緩沖液濃度STEP梯度
流速	40 nL/min
捕集柱	(5 mmL.×300 ?m I.D.) L-column （micro）
捕集時(shí)長(zhǎng)	5分鐘
脫鹽溶劑	水/蟻酸=100/0.1
脫鹽流速	L/min
脫鹽時(shí)長(zhǎng)	5分鐘

2維

柱	PicoFrit (100 mmL.×75 ?m I.D.)
流動(dòng)相	梯度洗脫 A)水/乙腈/蟻酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蟻酸=5/95/0.1(v/v)
流速	600nL/min
溫度	溫度
檢測(cè)	LCMS-IT-TOF
樣本	酵母蛋白中的蛋白（相當(dāng)于200 fmol的）

分別利用1維和2維中不同類(lèi)型的柱體進(jìn)行其他組合的分離模式也是可行的。在這種情況下，分離或檢測(cè)方法由于使用的移動(dòng)相分離模式或類(lèi)型之間的相互作用，可能會(huì)有一些限制。

連接MALDI-TOFMS使用

Prominence nano系統(tǒng)不僅僅可以通過(guò)nano ESI接口連接LCMS使用，還可連接到配有自動(dòng)點(diǎn)靶儀的MALDI-TOFMS儀器。為了準(zhǔn)確分析MALDI靶的每個(gè)色譜峰，需要LC能夠在1nL到1μL范圍之內(nèi)精確控制流速，Prominence nano系統(tǒng)的完全滿足了此需要。

酶解BSA樣品的UV色譜圖（500fmol）

分析條件

檢測(cè)器	UV220 nm
柱	MonoCap for Fast-flow 快速M(fèi)onoCap (250 mmL. × 100 μm I.D.)
流動(dòng)相	1、水/乙腈/蟻酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蟻酸=5/95/0.1(v/v) 2、梯度洗脫
流速	1 μL/min
溫度	環(huán)境溫度
捕捉柱	ODS (1 mmL. × 0.5 mm I.D.)
點(diǎn)靶間隔	12 秒的點(diǎn)斷每點(diǎn)液體：200nL（不包括基質(zhì)）

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