通過檢測識別血液中生物標志物來篩查早期人類疾病是生命健康領(lǐng)域備受關(guān)注的重要研究方向之一。 當前，臨床上常用的經(jīng)典分析技術(shù)，如酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），由于檢測靈敏度的限制通常很難檢測到低豐度蛋白質(zhì)生物標志物；而近些年來興起的數(shù)字蛋白檢測方法（digital ELISA）雖然能夠有效檢測到飛摩爾濃度級別的蛋白，但是，該項技術(shù)的實施通常涉及到專業(yè)昂貴的大型儀器，多個洗滌步驟，并且缺乏并行化處理樣本的能力，這些因素阻礙了其廣泛應(yīng)用。

近日，浙江大學(xué)良渚實驗室王永成研究員團隊開發(fā)了新一代離心生成液滴的數(shù)字蛋白檢測技術(shù)（CDPro），基于微通道陣列的微流控芯片，利用常規(guī)的離心機即能實現(xiàn)對多達數(shù)百個樣本同時快速液滴生成，同時實現(xiàn)微量血液中蛋白的超靈敏檢測。

該成果以“Highly Parallel, Wash-free, and Ultrasensitive Centrifugal Droplet Digital Protein Detection in Sub-Microliter Blood”為題，發(fā)表在英國皇家化學(xué)會期刊Lab on a Chip上，并入選為熱點文章（HOT Articles）。

圖1 離心液滴數(shù)字蛋白質(zhì)檢測（CDPro）流程示意圖
研究團隊開發(fā)了新一代離心生成液滴的微流控芯片，在此基礎(chǔ)上開發(fā)了基于液滴的數(shù)字免疫PCR技術(shù)，即通過一對特異性抗體-寡核苷酸（antibody-oligo）捕獲靶標蛋白，繼而在DNA連接酶的作用下，將靶標蛋白檢測信號轉(zhuǎn)化為核酸檢測信號。結(jié)合離心式液滴微流控芯片和數(shù)字免疫PCR技術(shù)，實現(xiàn)針對微量血漿中特定蛋白標志物的飛摩爾靈敏度檢測極限。

綜上所述，CDPro技術(shù)不僅具備超高的檢測靈敏度和檢測準確性，而且擁有樣品處理通量高、操作過程簡單、免清洗、用血量少、成本低等特點及優(yōu)勢，能夠提供給普通生物醫(yī)學(xué)實驗室進行科學(xué)研究，以及臨床上血漿中低豐度蛋白檢測分析。

責(zé)任編輯：彭菁