安捷倫1260高效液相色譜儀操作規(guī)程
一、概述
安捷倫1260高效液相色譜儀(以下簡稱HPLC)是一種高效、高靈敏度的分析儀器,能夠?qū)?fù)雜樣品進行快速、準(zhǔn)確的分離和檢測。本文詳細介紹了HPLC的操作規(guī)程,包括儀器的開/關(guān)機、系統(tǒng)檢查、色譜柱安裝、流動相配置、樣品制備、色譜條件設(shè)置、數(shù)據(jù)處理等環(huán)節(jié)。
二、儀器開/關(guān)機
- 開機 :
- 確保電源插座接地良好。
- 打開電源開關(guān),儀器自檢。
- 等待自檢完成,儀器進入操作界面。
- 關(guān)機 :
- 關(guān)閉所有模塊的電源開關(guān)。
- 斷開電源插座。
三、系統(tǒng)檢查
- 檢查流動相 :
- 確保流動相無雜質(zhì),無氣泡。
- 檢查流動相瓶的液位,確保足夠。
- 檢查色譜柱 :
- 確認(rèn)色譜柱型號、規(guī)格與實驗要求相符。
- 檢查檢測器 :
- 確保檢測器清潔,無污染。
- 檢查樣品瓶 :
- 確保樣品瓶干凈,無交叉污染。
- 檢查廢液瓶 :
- 確保廢液瓶有足夠的空間容納廢液。
四、色譜柱安裝
- 拆卸色譜柱 :
- 旋開色譜柱兩端的接頭。
- 安裝色譜柱 :
- 將色譜柱一端插入柱塞,旋緊。
- 將色譜柱另一端插入檢測器,旋緊。
- 柱溫控制 :
- 設(shè)置柱溫箱溫度,預(yù)熱至所需溫度。
五、流動相配置
- 溶劑選擇 :
- 根據(jù)實驗要求選擇合適的溶劑。
- 流動相混合 :
- 按照比例混合溶劑,確?;旌暇鶆颉?/li>
- 脫氣 :
- 使用真空脫氣或超聲波脫氣,去除流動相中的氣泡。
六、樣品制備
- 樣品溶解 :
- 將樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲小?/li>
- 樣品過濾 :
- 使用適當(dāng)孔徑的濾膜過濾樣品,去除顆粒物。
- 樣品稀釋 :
- 如有必要,對樣品進行適當(dāng)稀釋。
七、色譜條件設(shè)置
- 流速設(shè)置 :
- 根據(jù)實驗要求設(shè)置流速。
- 柱溫設(shè)置 :
- 設(shè)置柱溫箱的工作溫度。
- 檢測器參數(shù)設(shè)置 :
- 根據(jù)樣品特性設(shè)置檢測器的波長、靈敏度等參數(shù)。
- 進樣量設(shè)置 :
- 設(shè)置自動進樣器的進樣量。
- 運行時間設(shè)置 :
- 設(shè)置色譜分析的總運行時間。
八、樣品分析
- 樣品進樣 :
- 使用自動進樣器或手動進樣。
- 色譜分析 :
- 啟動色譜分析,觀察色譜圖。
- 數(shù)據(jù)處理 :
- 使用色譜工作站軟件對色譜圖進行處理,得到所需的數(shù)據(jù)。
九、儀器維護
- 色譜柱維護 :
- 定期更換色譜柱,保持柱效。
- 檢測器維護 :
- 定期清潔檢測器,確保檢測精度。
- 流動相過濾 :
- 定期更換流動相過濾器,防止堵塞。
- 系統(tǒng)清洗 :
- 定期對系統(tǒng)進行清洗,去除殘留物。
十、安全注意事項
- 操作安全 :
- 操作人員應(yīng)接受專業(yè)培訓(xùn),熟悉操作規(guī)程。
- 化學(xué)安全 :
- 使用化學(xué)品時,應(yīng)遵守實驗室安全規(guī)程。
- 電氣安全 :
- 確保儀器接地良好,避免電氣事故。
- 廢液處理 :
- 按照規(guī)定處理廢液,避免環(huán)境污染。
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