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一種用于外泌體分離富集和檢測(cè)的微流控芯片

電子工程師 ? 來(lái)源:lq ? 2018-12-31 14:14 ? 次閱讀
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腫瘤來(lái)源的外泌體(exosomes)在腫瘤微環(huán)境的胞間通訊中發(fā)揮著特殊作用,它們?cè)隗w液中含量穩(wěn)定且能夠靈敏地反映出腫瘤的實(shí)際狀態(tài),被認(rèn)為是“液體活檢”技術(shù)中一種極具潛力的腫瘤標(biāo)志物。外泌體研究中面臨的首要困難是如何從復(fù)雜的生物樣品中分離出這些微小囊泡,超速離心法是外泌體濃縮的經(jīng)典方法,但步驟冗雜、儀器昂貴,且回收率較低。對(duì)外泌體進(jìn)行定量的標(biāo)準(zhǔn)方法,例如ELISA和western blot,在需要較大樣品量的同時(shí),其靈敏度較低。此外,分步對(duì)外泌體進(jìn)行處理和分析的過(guò)程不僅耗時(shí)耗力,樣品也極易受到外界的污染。

近日,華東理工大學(xué)的葉邦策教授團(tuán)隊(duì)報(bào)道了一種集分離、富集和檢測(cè)為一體的肝癌相關(guān)外泌體分析平臺(tái)(ExoPCD-chip)。該微流控芯片由一個(gè)Y型微柱陣列組成的捕獲區(qū)域和級(jí)聯(lián)的ITO電極組成。預(yù)先修飾有Tim4蛋白的磁珠可以特異結(jié)合外泌體表面暴露出的磷酯酰絲氨酸,而芯片中的PDMS微柱則進(jìn)一步增強(qiáng)磁珠對(duì)外泌體的捕獲效率。富集到的外泌體隨后被磁力固定在ITO電極的表面,通過(guò)一條包含CD63識(shí)別序列和模擬DNA酶序列的核酸適配體來(lái)實(shí)現(xiàn)電化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)換的過(guò)程,在快速、高特異性外泌體識(shí)別的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)了高靈敏的電化學(xué)傳感分析。

圖1.(A)ExoPCD-chip示意圖;(B)ITO表面電傳感示意圖

該ExoPCD-chip僅需30 μL樣品,在4小時(shí)內(nèi)即可完成整個(gè)分離富集和檢測(cè)的全過(guò)程,其檢出限低于目前絕大多數(shù)文獻(xiàn)中報(bào)道的結(jié)果。更為重要的是,對(duì)血清樣品的分析結(jié)果證明,該芯片能夠有效區(qū)分肝癌病人和健康人,具有臨床檢測(cè)和癌癥診斷的潛力。

相關(guān)研究成果近期發(fā)表在Analytical Chemistry上,文章的第一作者為華東理工大學(xué)的講師徐慧穎和碩士生廖翀。

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原文標(biāo)題:一種用于外泌體分離富集和檢測(cè)的微流控芯片

文章出處:【微信號(hào):Microfluidics-Tech,微信公眾號(hào):微流控科技】歡迎添加關(guān)注!文章轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。

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