毫無疑問，哺乳動物細胞的培養(yǎng)是生物醫(yī)學研究中最重要的模型系統之一。盡管它們被廣泛使用，但哺乳動物細胞相對脆弱并且需要特殊的生長環(huán)境。這種環(huán)境幾乎全部由CO2培養(yǎng)箱提供。保持CO2培養(yǎng)箱正常運行且無污染對于哺乳動物細胞的成功培養(yǎng)至關重要，以下幾點是二氧化碳培養(yǎng)箱使用注意事項：

1、避免污染

哺乳動物細胞在富含營養(yǎng)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基的溫度有利于幾乎所有不管是否需要的微生物的生長。盡管許多研究人員在其培養(yǎng)基中使用抗生素和抗真菌劑作為預防污染的方法，但這并不能解決持續(xù)性的方法學錯誤，而且往往會隱藏有問題的事實。如果可能的話，避免使用這些藥劑，并努力改進你的無菌技術并開發(fā)一個能保持你的培養(yǎng)箱清潔干凈的系統。

培養(yǎng)箱的主要污染源是通過操作入口進入的微生物。這可能是顯而易見的，但把它放在首位將有助于您養(yǎng)成良好的操作習慣，這對防止全面污染有很大的幫助。將培養(yǎng)物放入培養(yǎng)箱時，務必戴上手套，盡量縮短內部玻璃門打開的時間。不定期地用70％的乙醇擦拭門把手。每周更換一次保濕托盤中的水以保證其干凈。定期用肥皂和水擦洗保濕盤，然后用乙醇擦拭; 或者，對保濕盤進行高壓滅菌。如果培養(yǎng)液溢出培養(yǎng)箱，請取下擱板并徹底清潔。

這些清潔儀式的頻率取決于培養(yǎng)箱的運輸次數。大型實驗室中的培養(yǎng)箱可能需要更頻繁的清潔。如果你從一個干凈的培養(yǎng)箱開始，并注意進出的物品，它應該保持清潔數周或數月

2、37°C恒溫

鑒于我們人體核心溫度努力保持在37℃，因此培養(yǎng)基的哺乳動物細胞在這個溫度下最舒適也就不足為奇了。大多數二氧化碳培養(yǎng)箱都配有一個顯示內箱溫度的顯示器，但最好定期仔細檢查，特別是如果你注意到細胞生長不理想或不典型。最好使用高質量的校準溫度計來完成。打開外部和內部培養(yǎng)箱門并將溫度計粘貼到玻璃門內部，以便在玻璃門關閉時從外部讀取溫度。在您離開實驗室之前，請執(zhí)行此操作。第二天早上，打開培養(yǎng)箱的外門，讀取溫度計。如果這一次讀數不是37°C（并且溫度計準確），你需要重新校準機載的溫度傳感器。

培養(yǎng)箱顯示：精確的溫度和CO2控制，可實現高細胞產量和活力。

3．保持潮濕

培養(yǎng)箱的內部保持在相對較高的溫度，因此培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)將成為沒有高濕度的真正原因。通過將水保持在位于培養(yǎng)箱底部的托盤中，可以在培養(yǎng)箱內保持較高的相對濕度（90％至95％）。這樣做的缺點是充水托盤是潛在的污染源（見上文）。

采用定期的維護和清潔計劃是保持CO2培養(yǎng)箱正常運行且細胞無污染的最有效方法。

4、確保二氧化碳濃度標準應該是培養(yǎng)箱應有的標準

大多數哺乳動物細胞培養(yǎng)基使用碳酸氫鹽緩沖系統。CO2是該緩沖系統的重要組成部分，其濃度必須保持在5％才能使培養(yǎng)基保持在生理pH值。雖然基本上所有現代培養(yǎng)箱都配備了CO2傳感器來維持所需的CO2含量，但隨著時間的推移，校準可能會偏離設定點，需要通過操作員（您）直接確定CO2濃度重新進行偏移校準。

測量培養(yǎng)箱中的CO2濃度最簡單、最準確的方法是使用氣體分析儀。這些儀器可以從許多科技型供應商處購買，并且可以用來設計成測量CO2或O2濃度的模型。氣體分析儀的工作原理是基于待測氣體化學吸收之后的液體體積膨脹。設備調零校準是使用了CO2濃度為0.04%的室內空氣，并且這種培養(yǎng)箱內的空氣是通過培養(yǎng)箱門或側面的孔進行取樣。

舊模型的培養(yǎng)箱可能需要更頻繁的重新校準。最好的新型號每個月都會對CO2傳感器進行零位校準。雖然這些型號很少需要手動重新校準，但用戶仍應根據其標準操作程序（SOP）的規(guī)定，使用Fyrite裝置檢查箱內CO2濃度并校準。

CO2傳感器，是培養(yǎng)箱正常工作最重要的一部分，因此必須重視起來，并且這個傳感器還要符合以上的要求，即抗高濕度，5%以上的寬量程，能工作在37℃環(huán)境下的，因此這里推薦SohaTech的SH-DS二氧化碳傳感器。其大致的參數特點和原理如下：

下面的就是SohaTech的SH-DS傳感器模塊，尺寸小，結構易安裝，專用接口是連接更加可靠！

SH-DS具體參數如下：

檢測原理

雙光波非色散紅外原理 （NDIR）

檢測量程

0 ~ 25%

精度

±60 ppm ± 3 % ppm @ 0 ~ 50℃

數據更新

2秒每次

預熱時間@25℃

《 90sec

工作環(huán)境

-10 ~ 50℃， 0 ~ 99.5% RH （無凝露）

輸出

模擬輸出： 0~3VDC （0~25%）

數字輸出：9600bps TTL Level 3.3V

電源

DC 5V ~ 9V輸入 ，推薦值5~7V

功耗

平均 35mA，峰值 80mA

接口

4PIN Header［CN1］

Molex 5267 included With 2.54mm spacing.

Refer to Dimensions

尺寸大小

（W）40mm x （H）36mm x （D）11.9 mm，重量 ： 12g